基质胶——3D类器官培养成功的关键
随着COVID-19疫情的持续影响,多国都开启了保护主义模式,全球化进程戛然而止,作为21世纪最具前景的生命科学也受到了相关冲击。在今年4~6月份,基质胶在全国大面积缺货,导致很多企业无法按时完成产品和服务交付、科研工作者科研成果不能及时发表以及即将毕业的莘莘学子们的毕业论文无法按时完成实验导致毕业进程受到很大的影响。在中美脱钩的影响下,如果出现关键性生物原料出现如芯片一样的卡脖子问题,将会对中国的生命科学产业和研究造成严重冲击,这是我们不想看到的,因此加速国产替代是个必然趋势和过程。
基质胶(Basement membrane matrix)是从富含胞外基质蛋白EHS小鼠肿瘤中提取出的可溶性基底膜制备物,其主要成分由层粘连蛋白,Ⅳ型胶原,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)和巢蛋白等组成,还包含生长因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF、组织纤溶酶原激活物和EHS肿瘤自身含有的其他生长因子。在1980年代中期由丹麦的 J. Engelbreth-Holm和Richard Swarm二者分别发现并具体描述基质胶[1],其主要生产过程是用盐水提取/洗涤肿瘤匀浆后可溶性蛋白质,再用溶剂萃取产物中不溶性复合物,在低温下使用缓冲液进行透析后获得无色到淡黄色溶液。
表:基质胶组分【1】
基质胶为组织和细胞提供支撑、抗拉强度和支架支撑,也可以作为细胞粘附和运动的三维亚结构以及生长因子、趋化因子和细胞因子的储存库,同时可作为细胞形态发生和分化的信号等。翌圣生物开发生产的Ceturegel™基质胶不含LDEV(乳酸脱氢酶增高病毒),超低内毒素含量,并全部经过支原体检测保证无支原体污染,包括基本浓度、高浓度、低生长因子等不同类型基质胶。
图.血管生成明场和荧光结果
拿到的基质胶有色差的变化(淡黄色到深红色)是什么原因?
对于含酚红的基质胶主要原因是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的,但是与5%CO2平衡后色差即会减少。冻融后,轻轻摇晃试剂瓶使基质胶分散均匀。
基质胶的操作要注意哪些事项?
所有操作需在无菌环境下进行,应使用预冷的器材以保证基质胶正常操作。
基质胶如何分装冻存使用?
可将冻融后的Ceturegel™基质胶分装在多个冻存管,冻存管需预冷,分装后迅速冷冻并保存,避免多次冻融。
[1] Kleinman H K , Martin G R . Matrigel: basement membrane matrix with biological activity.[C]// Seminars in Cancer Biology. 2005.
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